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怎么保证上样量一致
答:
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要保证上样量一致关键就是保证每个泳道样品的蛋白量一致 可以先进行浓度检测,通过浓度检测得出样品总蛋白量。根据总蛋白量调整SDS PAGE的上样体积,保证上样量一致 或者先行将SDS PAGE染色,根据条带大小调整上样体积也能保证上样量一致 ...
免疫组化 和
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的一抗 有什么区别
答:
一般的免疫组化一抗可以用作wb,只是稀释的倍数不同,wb比较省抗体。
请教
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曝光后胶片上残留小黑点
答:
有可能是封闭的时候,脱脂奶粉没有完全溶解,有颗粒,可以试试用0.2um的膜过滤一下脱脂奶粉,把颗粒过滤掉再做封闭,黑点可能就消失了。另外一种可能就是,转膜,或者孵育的容器不干净,每次都清洗干净以后再做。
western
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杂带及背景脏问题。
答:
先说这个实验总体的背景,有黑点,这种背景非常像封闭液没有完全溶解带有杂质,或者是容器没洗干净,有脏东西了,最好把封闭液用0.22um的膜过滤一下再做。然后其他器皿都洗刷干净。洗液里面加点tween试试。再一个看条带,感觉特异性不太好,条带太多了。看过抗体厂家提供的图也是这样的吗?可以先试...
为什么sds-page能跑出条带而
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没有
答:
转膜失败~蛋白质根本没有跑到膜上/一抗、二抗失效/显色液失效~
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怎么只出来杂带,无目的带
答:
应该是TBST洗的时间过短,一抗抚育完最少要洗十五分以上(三次)
实验室条件不够,想做
Western
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实验,有哪些靠谱的实验外包公司?_百度...
答:
现在这个行业发展的不错,生物实验技术外包也会跟着发展,比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展,或者涉及的设备比较昂贵,技术要求高,都会寻求外包。但是现在竞争也比较大,的得看单位这边整体做的怎么样。做的比较好的,一般都是上海地区的,你可以看下基尔顿生物。
蛋白质的分子量在120KD,做
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跑胶时,用多大浓度的胶,蛋白...
答:
15% 15~45kDA 7.5% 30~120kDA 胶浓度越大,跑的蛋白分子量越小,你可以选择6%的,不过那样的话你就要跑就点,一般恒压140V跑。而且你的蛋白很浅应该不一定是跟胶有关,很多因素啊。也许你的抗体不是很好用(很细我不知道你什么意思,一般都是呈带状),或者你上的蛋白太少了,一般我...
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为什么marker能转上而样品转不上
答:
因为marker里面的蛋白都是性质已知,相对纯度和浓度都较高的蛋白样品,无论是大小,迁移率都经过各种检测的。而自己的样品可能会受到目标蛋白本身性质的影响,造成转印过程中效率与同等大小蛋白marker条带的蛋白不一致。所以marker的转印可以做参考,但是如果出现这种现象,还是需要再进行优化的。当然,首先要...
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化学发光为什么出现高背景
答:
做
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发光实验经常有“背景太高”问题的出现,要弄清“背景太高”的原因,先要知道“背景”是什么,“背景”也是发光,影响发光的因素就会影响背景. 影响发光的因素主要有:1.含HRP的抗体;2.发光试剂;3.和发光试剂反应的杂质,如含杂质的膜.这里面,在很短时间内...
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